一條跟前縮宮素mRNA 的AUG區(qū)域互補的反義PNA合成后,再連上可以迅速進入細(xì)胞的多肽片段。在這種多肽的幫助下,PNA能夠在幾分鐘內(nèi)進入細(xì)胞內(nèi)。單獨的,沒有連有肽段的PNA也能夠進入細(xì)胞內(nèi),但是速度慢很多。PNA的細(xì)胞毒性較低,當(dāng)PNA的濃度低于10uM ,且培養(yǎng)時間在24小時之內(nèi)時,沒有檢測到PNA對細(xì)胞的活動產(chǎn)生影響 。下丘腦視上的大神經(jīng)細(xì)胞,可以分泌縮宮素和抗利尿激素。這種細(xì)胞在特定的,含有認(rèn)為控制的培養(yǎng)液中培養(yǎng)。結(jié)果表明,PNA跟 peptide-PNA 都能減少縮宮素mRNA的量,而一條任意的PNA(不跟縮宮素mRNA互補的任意PNA)不能減少縮宮素mRNA的量。 免疫細(xì)胞化學(xué)的顯示,這種反義PNA還能減少縮宮素前體蛋白的表達量。
綜上,反義PEPTIDE-PNA 是細(xì)胞培養(yǎng)中非常有用的反義試劑。
3種PNA: 從上倒下分別是 沒有連特殊多肽的PNA,連有特殊肽段的peptide-PNA,作為對照的任意PNA
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研究進展
PNA跟多肽鏈接后形成PNA-peptide , 其轉(zhuǎn)染進神經(jīng)細(xì)胞的速度比單獨的PNA 快很多。其反轉(zhuǎn)錄活性抑制目標(biāo)mRNA和目標(biāo)蛋白的表達。
發(fā)布時間:2017/7/24