PNA(Peptide nucleic acid,肽核酸)是一種人工合成的類似于DNA,RNA的化學物質(zhì)。PNA的骨架是由重復的N-2-(氨乙基)-甘氨酸為單位,經(jīng)由肽鍵組合而成。堿基與骨架之間是以亞甲羧鍵相連。與多肽相似的是,PNA也有N端和C端的差別。同時由于PNA沒有如DNA,RNA上的磷酸基團,因此PNA與DNA,RNA之間缺乏電性相斥的現(xiàn)象,使得兩者之間的結合強度大于DNA與DNA之間的結合。由于PNA既不屬于多肽,也不屬于核酸,因此,PNA不易被蛋白酶或核酸酶水解,無論在體內(nèi)還是在體外,PNA都相當穩(wěn)定,同時,由于堿基之間配對特異性極強,熱穩(wěn)定性高;诖嗽恚琍NA可以有如下應用:
Globin
Reduction PNA: 血液中的globin mRNA占總mRNA的70%以上,會嚴重影響non-globin mRNA的擴增。在進行反轉(zhuǎn)錄以及隨后PCR 擴增的過程中,PNA均可以用作序列特異的blocker,阻止globin的反應,從而使non-globin mRNA更容易被擴增出來。
PNA
Mutyper: 結合PNA Clamp以及Real Typer技術,基于對Real-time PCR溶解曲線(Melting curve)分析,高效鑒別突變位點及突變類型。
針對wild type DNA
sequences設計PNA clamp probe,阻止wild type DNA擴增,針對mutant type DNA sequence設計含有fluorescent dye以及quencher的PNA detection probe,通過real-time PCR的melting curve鑒別突變位點。
由于PNA自身特性,PNA Mutyper能夠準確高效鑒別低至一個位點的突變。
PNA Real
Typer: 結合PNA Clamp以及Real Typer技術,基于對Real-time PCR溶解曲線(Melting curve)分析,高效鑒別突變位點及突變類型。
針對wild type DNA
sequences設計PNA clamp probe,阻止wild type DNA擴增,針對mutant type DNA sequence設計含有fluorescent dye以及quencher的PNA detection probe,通過real-time PCR的melting curve鑒別突變位點。
由于PNA自身特性,PNA Mutyper能夠準確高效鑒別低至一個位點的突變。
PNA
miRNA inhibitors: PNA與RNA的結合能力比DNA與RNA的結合能力強,因此 PNA 可以與相互配對的 miRNA 特異性結合,從而抑制 miRNA自身的調(diào)控作用。同時,我們將細胞穿膜肽(Cell penetrating
peptides, CPPs) 與 PNA miRNA
Inhibitors相連,這樣,無需轉(zhuǎn)染試劑盒,PNA miRNA inhibitors即能夠進入細胞內(nèi),達到抑制目標miRNA的目的。已有研究證明PNA miRNA Inhibitors 是體內(nèi)試驗的有效工具。
PNA
Clamp Kit: PNA Clamp技術是指PNA能夠?qū)R恍缘呐c野生型DNA結合,從而使野生型DNA不能作為模板進行PCR擴增;而突變型DNA,由于堿基的缺失或突變,PNA不能與其結合,從而使突變型DNA能夠進行PCR擴增。
PNA FISH
Probes: PNA能夠作為特異探針應用于基因檢測。與DNA探針相比,PNA探針序列更短,所需濃度更低,雜交速度更快。并且PNA探針不帶電荷,生物穩(wěn)定性極高,特異性、親和性和細胞通透性都比DNA更高,PNA在雜交中的高穩(wěn)定性和對錯配的高度分辨力使其具有作為探針的明顯優(yōu)勢。